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抗氧化劑是一類能幫助捕獲并中和自由基,從而祛除自由基對(duì)人體損害的一類物質(zhì)。植物中發(fā)現(xiàn)的許多酚類化合物以及一些維生素,都具有抗氧化活性。通常用比色法衡量總抗氧化能力,表示為Trolox(水溶性維生素E)當(dāng)量或沒食子酸當(dāng)量。
目前對(duì)抗氧化劑測(cè)試方法的要求不僅是能檢測(cè)樣品的總抗氧化能力,還要求根據(jù)抗氧化劑的生物效益對(duì)其進(jìn)行區(qū)分和量化分析。我們的方法研究表明,比色法試劑如福林酚試劑和ABTS試劑,均可以通過高效液相色譜柱后衍生化法對(duì)食品和膳食補(bǔ)充劑中抗氧化劑進(jìn)行分析。
福林酚測(cè)試法,在堿性條件下,多酚或其他抗氧化劑可以將磷鎢鉬酸還原成藍(lán)色,藍(lán)色深淺與多酚或其他抗氧化劑含量成正比,可以用分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。該試劑對(duì)酚類和非酚類抗氧化劑,包括維生素C、維生素B1和葉酸,具有很高靈敏度,對(duì)許多抗氧化劑檢測(cè)限低至1 ug/mL。
ABTS試劑用于總抗氧化能力(TEAC)法。在抗氧化物存在時(shí)ABTS+的產(chǎn)生會(huì)被抑制,并可通過紫外檢測(cè)器檢測(cè)吸光度間接計(jì)算抗氧化能力,該檢測(cè)方法可以分析40-200 ug/ml的抗氧化劑。
使用上述兩種試劑可以對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行定性和定量分析,并通過與Trolox或沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜比較計(jì)算樣品的總抗氧化能力。